Există multe modalități de a măsura creșterea bacteriană și o cale este mai complicată decât cealaltă. Deși uneori trebuie ignorată consistența măsurătorilor, cea mai ușoară cale este suficientă pentru a măsura cu precizie creșterea bacteriană, astfel încât este adesea utilizată. Cele mai frecvent utilizate metode sunt monitorizarea și numărarea bacteriilor, măsurarea masei uscate sau umede și măsurarea nivelurilor de turbiditate / turbiditate. Laboratorul școlii dvs. ar trebui să aibă instrumentele și echipamentele necesare pentru a efectua cel puțin unul dintre aceste experimente.
Etapa
Metoda 1 din 3: Monitorizarea bacteriilor în direct
Pasul 1. Pregătiți ingredientele
Există multe instrumente speciale care trebuie pregătite și este posibil să nu fie disponibile într-un laborator de biologie. Pregătiți toate echipamentele și containerele înainte de a rula experimentul, astfel încât să nu existe probleme în timpul procesului. Va trebui să cunoașteți fiecare ingredient utilizat imediat și termenii de bază ai acestui experiment.
- Pregătiți camera de numărare. Are o cameră încorporată, sticlă pentru microscop și microscop, astfel încât este ușor de configurat și de utilizat. O puteți cumpăra de la un laborator sau magazin de rechizite școlare. Acest instrument ar trebui să aibă instrucțiuni care să vă ghideze pe parcursul întregului proces.
- Pregătiți o ceașcă de turnare sau o ceașcă întinsă. Ambele containere vă permit să monitorizați bacteriile din interior.
- Cultura este un termen folosit pentru a descrie creșterea organismelor într-un experiment.
- Bulionul este un mediu lichid în care cultura crește.
Pasul 2. Folosiți metoda plăcii de turnare sau a plăcii de întindere
De asemenea, puteți așeza bacteriile direct pe vas pentru vizualizare cu ajutorul unui microscop. Se toarnă cultura pe o farfurioară și se pune la microscop. Monitorizați numărul de celule bacteriene prezente.
Pasul 3. Asigurați-vă că doza de concentrație este corectă
Dacă sunt prea multe, bacteriile se vor aduna una pe cealaltă și este posibil să calculați greșit. Diluați cultura amestecând în mai mult bulion. Dacă sunt prea puține, rezultatele calculului nu vor fi exacte. Se strecoară bulionul folosind un sistem de filtrare.
Pasul 4. Numărați bacteriile
Ultimul pas este de a număra bacteriile pe rând. Uită-te prin lentila de mărire din camera de numărare și notează numărul de bacterii pe care le vezi. Comparați rezultatele cu rezultatele altor teste.
Metoda 2 din 3: Măsurarea masei uscate și umede
Pasul 1. Asigurați-vă că aveți echipamentul potrivit
Această metodă folosește echipamente scumpe și mult timp. Dacă laboratorul dvs. nu are echipamentul de care aveți nevoie, este o idee bună să utilizați o altă metodă. Cu toate acestea, dacă laboratorul dvs. este suficient de bine echipat, vă recomandăm această metodă, deoarece oferă rezultate mai consistente. În această metodă, veți avea nevoie de:
- Cuptor cu convecție gravitațională hidraulică
- Recipient de cântărire din aluminiu
- Un set de baloane (sticle de laborator)
- Mașină centrifugă (centrifugă) sau sistem de filtrare de laborator
Pasul 2. Asigurați-vă că cultura este în balon
Adăugați cultura la dovleac. În acest stadiu, cultura ar trebui să fie un bulion, deși mai târziu va fi separat din nou.
Pasul 3. Uscați recipientul de cântărire din aluminiu în cuptorul de laborator
În schimb, puteți utiliza o membrană filtrantă de acetat de celuloză cu un diametru de 47 mm și o dimensiune a porilor de 0,45 µm. Indiferent de recipientul de cântărire pe care îl utilizați, cântăriți-l, deoarece va trebui dedus mai târziu la cântărirea celulelor bacteriene.
Pasul 4. Se amestecă cultura în balon până se amestecă uniform
Celula se va scufunda natural din cauza gravitației și va trebui agitată pentru a se răspândi uniform în balon. În acest fel, puteți avea mai multe mostre.
Pasul 5. Folosiți o centrifugă pentru a separa celulele bacteriene de bulion
Acest instrument rotește balonul și se echilibrează rapid, astfel încât drenează bulionul și lasă cultura în balon.
Pasul 6. Răsturnați pasta de pe dovleac și puneți-o într-un recipient de cântărire
Aruncați bulionul pentru că nu mai aveți nevoie de el. Totuși, nu scăpați încă de dovleac, deoarece va fi folosit în continuare.
Pasul 7. Clătiți mașina centrifugă și turnați apa de clătire în recipient
Aruncați apa de clătire în balon pe celulele bacteriene pentru a obține greutatea umedă.
Pasul 8. Găsiți greutatea uscată
Pentru a măsura greutatea uscată, introduceți recipientul în cuptor și uscați-l la 100 ° C timp de 6-24 ore conform instrucțiunilor din cuptor și / sau recipientul de cântărire utilizat. Asigurați-vă că temperatura nu este prea ridicată, astfel încât bacteriile să nu ardă. Cântăriți bacteriile când ați terminat și nu uitați să reduceți rezultatul cu greutatea recipientului de cântărire.
Metoda 3 din 3: Măsurarea turbidității
Pasul 1. Pregătiți echipamentul necesar
Veți avea nevoie de o sursă de lumină și un spectrofotometru. Ambele pot fi obținute la magazinele de aprovizionare cu laborator. Spectrofotometrul trebuie să aibă instrucțiuni care să vă ghideze în utilizarea instrumentului în funcție de modelul pe care îl aveți. Prețul spectrofotometrului este destul de accesibil și ușor de utilizat, astfel încât acesta poate deveni una dintre cele mai frecvent utilizate metode de măsurare a creșterii bacteriene.
Pasul 2. Aprindeți proba
Conform termenului lui Layman, turbiditatea este nivelul de turbiditate al unui eșantion. Trebuie să obțineți numărul de măsurare a turbidității, care este măsurat în NTU (Nephelometric Turbidity Unit). Acest instrument trebuie calibrat înainte de a putea măsura proba cu precizie.
Pasul 3. Înregistrați rezultatele
Turbiditatea este afectată de numărul de bacterii din probă. Spectrofotometrul vă va indica, de asemenea, procentul de transmisie (% T). Această cifră va crește dacă turbiditatea scade. Comparați rezultatele cu rezultatele altor teste pentru a măsura creșterea bacteriană.
Avertizare
- Deoarece aveți de-a face cu o colonie bacteriană, luați măsuri de precauție purtând echipamente de siguranță, cum ar fi ochelari de protecție și mănuși. De asemenea, este o idee bună să porți o mască, mai ales dacă nu știi tipul de bacterii studiate.
- Luați măsuri de precauție înainte de a manipula orice tip de bacterie, chiar și cea inofensivă. Asigurați-vă că toate rănile deschise de pe corp sunt complet acoperite înainte de a începe.
