Pipetele sunt echipamente de laborator utilizate pentru măsurarea și transferul unor volume foarte mici de lichide. Precizia în măsurătorile pipetei este foarte importantă deoarece diferențele de volum scăzute de pipetă pot afecta rezultatele experimentale. Pentru a asigura acuratețea, este important să verificați calibrarea pipetei la fiecare câteva luni. Procesul de calibrare este util pentru verificarea dacă acest echipament picură lichid în volumul potrivit, astfel încât să poată fi reparate dacă este necesar.
Etapa
Partea 1 din 2: Verificarea calibrării
Pasul 1. Adună materialele necesare
Pentru a verifica calibrarea pipetei, este nevoie de o pipetă, vârfuri pentru pipetă, apă distilată, pahar, termometru, balanță și pahar de cântărire. Balanța utilizată trebuie să fie în scară de micrograme pentru a calibra micropipeta cu o valoare maximă de 1 L.
- Nu veți avea nevoie de mai mult de 5 ml de apă. Umpleți paharul cu apă.
- Asigurați-vă că vârful pipetei este corect și se potrivește perfect în pipetă.
Pasul 2. Măsurați temperatura apei distilate
Puneți termometrul în apă și lăsați-l să stea cel puțin un minut. Dacă linia roșie a termometrului este încă în mișcare, așteptați încă un minut. După un minut, înregistrați temperatura. Luați termometrul și uscați-l când ați terminat.
Este important să știm temperatura apei, deoarece va fi utilizată pentru calculele efectuate pentru a verifica calibrarea
Pasul 3. Așezați cupa de cântărire pe balanță și puneți la zero balanța
În mod ideal, balanța utilizată are în interior o ușă și un spațiu izolat. Așezați cupa de cântărire în camera de echilibrare și închideți ușa. Dacă balanța dvs. nu are o cabină și o ușă, puneți doar o cană de cântărire pe balanță. Apăsați butonul „Zero” sau „Tara” și așteptați ca scala să arate zero.
Reducerea la zero a cântarului reduce greutatea paharului din plastic și vă permite să cântăriți doar greutatea substanței plasate în pahar
Pasul 4. Pregătiți pipeta pentru calibrare
Ștergeți pipeta cu etanol înainte de a începe și asigurați-vă că nimic nu înfundă vârful pipetei. Atașați vârful pipetei corect la vârful pipetei și determinați volumul de testat.
Pentru calibrare, testați cele mai mici și cele mai mari volume care pot fi scoase din pipetă
Pasul 5. Spălați vârful pipetei înainte de a-l calibra
Apăsați butonul până la prima limită și introduceți vârful pipetei în apa distilată la o adâncime de aproximativ 2 mm. Eliberați butonul pentru a absorbi o parte din lichid și apoi eliberați din nou lichidul apăsând butonul. Repetați acest pas de trei ori pentru a spăla vârfurile picurătorului înainte de utilizare.
Apăsați butonul până la a doua limită pentru a elimina lichidul rămas pe vârful pipetei, apoi scoateți pipeta din apă
Pasul 6. Sugeți volumul de calibrare
Cu vârful pipetei poziționat în afara apei distilate, apăsați butonul până la prima limită. Scufundați vârful pipetei cu o adâncime de 2 mm în apa distilată și eliberați butonul pentru a aspira lichidul în vârful pipetei. Așteptați aproximativ 1 secundă înainte de a îndepărta vârful picurătorului din apă.
Asigurați-vă că vârful pipetei este complet scufundat în timpul procesului de aspirație. Nu ar trebui să existe bule în vârful picurătorului sau rezultatul poate fi greșit
Pasul 7. Se toarnă lichidul în vasul de cântărire de pe balanță
Așezați vârful pipetei pe fundul cupei de cântărire și apoi apăsați butonul pipetei până la prima limită. Treceți la un alt punct, puțin departe de apă, apoi apăsați butonul până la a doua limită. Ținând butonul apăsat, ridicați vârful pipetei din paharul de cântărire.
Păstrați vârful atașat la pipetă, deoarece îl veți folosi din nou pentru alte teste de calibrare
Pasul 8. Înregistrați greutatea afișată pe balanță
Închideți ușa cabinei de echilibru dacă utilizați o balanță. Așteptați până când numerele nu se mai schimbă. Scrie in caietul tău.
Este important să așteptați până când numerele de pe scară nu se schimbă din nou înainte de a le scrie. Notele vor merge prost dacă nu așteptați
Pasul 9. Repetați acest proces pentru a efectua citirea de cel puțin 10 ori
Puneți la zero cântarul din nou, spălați vârfurile pipetei înainte de utilizare, aspirați același volum de lichid, îndepărtați volumul, apoi înregistrați greutatea. Înregistrați greutatea apei distilate pentru același volum, apoi mediați toate notele.
Puteți repeta acest proces pentru volume diferite dacă fiecare volum este testat de mai multe ori
Partea 2 din 2: Calcularea rezultatului calibrării
Pasul 1. Definiți formula pentru volumul calculat
Formula pentru calcularea volumului de lichid evacuat de pipetă este V = w * Z, w este greutatea apei, Z este factorul de conversie bazat pe densitatea apei, în timp ce V este volumul cantității de apă îndepărtat.
- Variabila Z poate fi obținută calculând densitatea apei utilizând temperatura înregistrată la începutul experimentului.
- De exemplu: Dacă temperatura apei este de 23 ° C, valoarea Z este de 1,0035 g / mg.
Pasul 2. Calculați media generală a calibrărilor pipetei
Volumul de apă eliberat de pipetă a fost cântărit de cel puțin zece ori. Pentru a medie toate aceste valori, adăugați-le pe toate împreună și împărțiți-le la 10. Dacă ați făcut mai mult sau mai puțin din proces, adăugați rezultatele generale și apoi împărțiți la numărul de încercări efectuate.
- De exemplu: Greutatea apei din cele 10 experimente pe care le-ați efectuat cu pipeta de 10µL este după cum urmează: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 și 9, 98.
- Media este: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98) / 10 = 99, 84/10 = 9.984
Pasul 3. Conectați variabilele la ecuație și rezolvați
După ce determinați numărul corect pentru fiecare variabilă, conectați-o la formulă și completați volumul calculat. Pentru a rezolva această ecuație, pur și simplu înmulțiți greutatea medie a tuturor încercărilor cu valoarea Z.
De exemplu: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Pasul 4. Calculați acuratețea pipetei
Folosiți ecuația A = 100 x Vmedie/ V0 pentru a calcula precizia pipetei. A indică precizia pipetei, Vmedie este volumul mediu calculat și V0 este valoarea setată pe pipetă. Valoarea de precizie trebuie să fie între 99-101%.
- Dacă pipeta este calibrată corespunzător, valoarea calculată ar trebui să fie foarte aproape de valoarea reală setată pe pipetă.
- De exemplu: A = 100 x Vmedie/ V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1.0019 = 100,19%
- Această pipetă este calibrată corespunzător.
Pasul 5. Dacă este necesar, trimiteți pipeta pentru calibrare
Dacă pipeta dvs. nu trece testul de calibrare, nu-l utilizați pentru experimentare chiar acum. Pipetele sunt echipamente de laborator foarte fragile și costisitoare. Nu puteți remedia calibrarea singur, pipeta trebuie trimisă pentru reparare. Alternativ, mai multe companii vor veni la laboratorul dvs. și vor calibra pipeta la fața locului.
